在蛋白質純化、病毒載體制備等生物醫藥研究生產過程中,核酸污染,尤其是宿主基因組DNA污染是一個非常關鍵的問題。宿主DNA的殘留不僅會影響目標產物的純化效果,還可能引發機體的免疫反應,因此受到嚴格監管。傳統核酸酶在高鹽條件下活性較弱,而 HL-SAN 25k 作為一種耐高鹽的非特異性核酸內切酶,在高鹽濃度(如 0.5 M NaCl)下表現出優異的活性,能夠高效去除宿主DNA。
作為arcticzymes公司中國經銷商,上海起發強烈推薦arcticzymes熱銷產品HL-SAN 25k非特異性核酸內切酶。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
HL-SAN是一種非特異性內切核酸酶,適用于高鹽濃度下的核酸去除。該酶能夠在蛋白質純化過程中去除污染的核酸,同時保護蛋白質的完整性。它能夠以大約10:1的比例消化DNA和RNA。
酶學特性
來源:重組表達于畢赤酵母細胞。
酶比活:≥1.75×105 Units/mg。
酶活定義:在37℃,25 mM Tris-HCl(pH 8.5),5mM MgCl2,500 mM NaCl的反應體系中,1個單位的HL-SAN在30分鐘內消化50 µg/ml的小牛胸腺DNA,可以在OD260nm處產生1A的吸光值變化。
特異性:非特異性內切核酸酶,能夠將單鏈和雙鏈DNA及RNA消化成5-13個堿基的寡核苷酸。
最佳活性條件
溫度:7-38℃和4°C過夜,最佳溫度為30-38℃。
鹽濃度:0-1000 mM(NaCl/KCl),最佳濃度為400-700 mM。
pH范圍:6.8-9.5,最佳pH為8.0-8.9。
Mg2+濃度:>1 mM,最佳濃度為5-50 mM。
產品優勢
非特異性內切核酸酶,適用于高鹽濃度(0.5 M NaCl)下的核酸去除。
在低溫(6℃)下仍保持20%的活性。
寬pH范圍和溫度穩定性。
適用于高鹽緩沖液中的核酸去除。
應用領域
蛋白純化:高效去除與蛋白質結合的核酸,尤其適用于DNA結合蛋白。
病毒載體制備:如腺相關病毒(AAV)和腺病毒(AdV)。
宏基因組測序(mNGS):去除宿主DNA,提高病原體檢測效率。
其他應用:降低樣品粘度,去除核酸污染。
訂購信息
貨號 | 品名 | 規格 | 濃度 | 品牌 |
70910-202 | HL-SAN 25k | 25000 U | 25 U/uL | arcticzymes |
實驗展示
圖左:通過未釋裂解液和His-trap洗脫液的瓊脂糖凝膠電泳顯示,在這兩種情況下,大部分DNA仍保留在其中,添加了HL-SAN極大地減少了粗裂解液中的DNA含量
圖右:通過qPCR檢測His-trap洗脫液中的大腸桿菌23S DNA,結果顯示添加了HL-SAN將DNA含量減少了約10,000倍。
圖2:與未處理的樣品相比,在裂解液中添加了HL-SAN處理的DNA將10,000倍流速減少;洗脫液中減少約為200倍。而同時處理裂解液和洗脫液,添加了HL-SAN可將DNA減少約4,000倍。
ArcticZymes 是一家專注于開發和商業化新型冷適應酶的高科技生物公司。公司成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。ArcticZymes 利用北極海洋d特的環境,從極地微生物中發現和開發冷適應酶,廣泛應用于分子研究、體外診斷和治療領域。
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