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abbexa abx513030說(shuō)明書

更新時(shí)間:2020-06-30      點(diǎn)擊次數(shù):739

abbexa abx513030說(shuō)明書

1,25-Dihydroxyvitamin D3 (Calcitriol) ELISA Kit

Catalogue No: abx513030

Price: £395.00 

Available Options

* Size: 96 tests 

Calcitriol ELISA Kit is an ELISA kit against Calcitriol

骨化三醇ELISA試劑盒是針對(duì)骨化三醇的ELISA試劑盒。 
 

目標(biāo)1,25-二羥基維生素D3(骨化三醇)
反應(yīng)性一般(所有物種)
經(jīng)過(guò)測(cè)試的應(yīng)用ELISA法
建議稀釋稀釋/濃度應(yīng)由終用戶確定。
存儲(chǔ)出廠時(shí)溫度為4°C。收到后,請(qǐng)按照試劑盒手冊(cè)中的存放說(shuō)明存放試劑盒。
有效期該套件的有效期為6個(gè)月。
穩(wěn)定性試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下,有效期內(nèi)的丟失率小于5%。為了大程度地降低性能波動(dòng),應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)試始終由同一用戶執(zhí)行。
測(cè)試范圍15.6 pg / ml-1000 pg / ml
靈敏度<3.6皮克/毫升
標(biāo)準(zhǔn)格式凍干
ELISA檢測(cè)比色法
ELISA數(shù)據(jù)定量的
樣品類型血清,血漿和其他生物液體。
測(cè)定原理該試劑盒基于三明治酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑,并孵育整個(gè)平板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有含有足夠量的骨化三醇的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與結(jié)合在板上的骨化三醇的量成比例。在酶標(biāo)儀中于450 nm處用分光光度法測(cè)量光密度(OD),由此可計(jì)算出骨化三醇的濃度。
套件組件
  • 預(yù)涂96孔微孔板
  • 標(biāo)準(zhǔn)
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液
  • 洗滌緩沖液
  • 檢測(cè)試劑A
  • 檢測(cè)試劑B
  • 稀釋劑A
  • 稀釋劑B
  • TMB基板
  • 停止解決方案
  • 封口機(jī)
必需但未提供的材料
  • 37°C恒溫箱
  • 多通道和單通道移液器以及無(wú)菌移液器吸頭
  • 噴瓶或自動(dòng)微孔板清洗機(jī)
  • 1.5毫升管
  • 蒸餾水
  • 吸收性濾紙
  • 100毫升和1升刻度量筒
  • 酶標(biāo)儀(波長(zhǎng):450 nm)
  • ELISA搖床
試劑準(zhǔn)備
  • 1)標(biāo)準(zhǔn)液:用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制標(biāo)準(zhǔn)液,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后,按照協(xié)議中的說(shuō)明,使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列稀釋。
  • 2)洗滌緩沖液:按照協(xié)議中的說(shuō)明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。
  • 3)檢測(cè)試劑制備:計(jì)算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1:100稀釋檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B。
測(cè)定步驟
  • 1)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試樣品和對(duì)照孔。
  • 2)將100μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。
  • 3)將100μl標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液等分到對(duì)照(零)孔中。
  • 4)將100μl稀釋樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 5)將100μl檢測(cè)試劑A分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 6)洗3次。
  • 7)將100μl檢測(cè)試劑B分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育30分鐘。
  • 8)洗5次。
  • 9)將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。
  • 10)分裝50μl終止溶液。
  • 11)在450 nm下測(cè)量OD。
協(xié)議
  • 使用前,將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫(18-25°C)。建議為每個(gè)測(cè)試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  • 1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔,測(cè)試樣品孔和對(duì)照孔(零孔),然后記錄其位置。建議測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品至少一式兩份。
  • 2.將100 µL的每種標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品和樣品加入適當(dāng)?shù)目字小S蒙w密封板并在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 3.取下蓋子并丟棄液體。
  • 4.向每個(gè)孔中添加100μl檢測(cè)試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer清洗板3次。
  • 6.將100 µL檢測(cè)試劑B工作溶液添加到每個(gè)孔中,密封并在37°C孵育30分鐘。
  • 7.棄去溶液并按照上一步中的說(shuō)明用洗滌緩沖液將板洗滌5次。
  • 8.將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線下。孵育時(shí)間僅供參考,時(shí)間應(yīng)由終用戶確定。請(qǐng)勿超過(guò)30分鐘。
  • 9.向每個(gè)孔中加入50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結(jié)果計(jì)算為了進(jìn)行計(jì)算,請(qǐng)對(duì)每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)品和每個(gè)樣品的OD450重復(fù)讀數(shù)取平均值,然后減去平均對(duì)照(零)OD450讀數(shù)。可以將標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制為每種參考標(biāo)準(zhǔn)溶液(Y)的相對(duì)OD450與每種標(biāo)準(zhǔn)溶液(X)的各自濃度的關(guān)系。樣品的骨化三醇濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插。
可用性在5-12個(gè)工作日內(nèi)發(fā)貨。
注意本產(chǎn)品僅供研究使用。

 

范圍和靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化。請(qǐng)與我們聯(lián)系以獲取的產(chǎn)品信息。為了獲得準(zhǔn)確的結(jié)果,必須將樣品濃度稀釋到試劑盒的中間范圍。
請(qǐng)注意,我們的ELISA和CLIA試劑盒針對(duì)檢測(cè)天然樣品(而非重組蛋白)進(jìn)行了優(yōu)化。我們無(wú)法保證檢測(cè)到重組蛋白,因?yàn)樗鼈兣c天然蛋白可能具有不同的序列或三級(jí)結(jié)構(gòu)。

 

 

 

 

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