工程DNA聚合酶-來自博登湖
mypols是一家生物技術公司,起源于康斯坦茨大學(University of Konstanz),Andreas Marx教授的研究小組。
自2014年成立以來,我們就提供DNA聚合酶方面的專業知識:我們為您的biotec應用設計,定制,生產和凍干酶。我們專注于開發新一代的DNA聚合酶,用于先進且可靠的應用,例如個性化醫學,病原體檢測,DNA和RNA診斷,法醫等等。
mypols Volcano2G說明書
€95,00
Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本,具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種經過工程改造的,極耐熱的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶,可通過定向的人工進化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板(無需等溫逆轉錄步驟)直接促進“零步驟” RT-PCR,因為逆轉錄與循環PCR延伸步驟中的DNA擴增同時進行。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應,從而將在高溫下融化的RNA中強大的二級結構所遇到的問題降至低。
Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動劑配制的,具有逆轉錄酶活性的工程穩定的熱穩定DNA聚合酶和穩健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于適體的熱啟動劑設計用于在低溫下(例如,在移取反應混合物時)阻斷非特異性DNA聚合酶活性,但會在高于50-55°C的溫度下分解,從而釋放出現已*活化的DNA聚合酶。
Volcano2G DNA聚酶作為5 U / µl甘油庫存與適當的5x Volcano反應緩沖液一起運輸,該緩沖液針對60-300 bp的擴增子進行了優化。
Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測RNA靶標。它不需要Mn 2+即可 獲得宜活性。但是,可以通過向反應中添加Mn 2+來進一步優化某些檢測方法(建議范圍是0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。
該產品以涼爽包裝出售。建議在到達-20°C時存放產品。
RT-PCR活性:已對 Volcano3G RT-PCR Mix進行了成功的RT-PCR性能測試。在實時PCR循環儀中從人總RNA提取物中擴增出151 bp片段(HPRT1 mRNA),并可視化為單個擴增產物。
DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質特異性染色確定。
跳過逆轉錄步驟。不需要等溫逆轉錄步驟。
Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉錄酶,非常穩定,在95°C下的半衰期> 40分鐘。
當添加實時PCR染料時,Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域,使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。
對于細胞RNA的可靠RT-PCR,樣品制備步驟*。然而,這些步驟費力,費時并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液,您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費力的RNA制備。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液具有簡化的“零步驟”工作流程,使您可以規避費力的純化和提取步驟,從而節省了時間和金錢。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現了低至單個細胞的檢測靈敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G協議從單個隆德人中腦(LUHMES)細胞中檢測到GAPDH mRNA。
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